«СЕРТИФИЦИРОВАННОГО ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА ВИНОГРАДА В.С.Петров, Л.М.Малтабар, А.И.Талаш, Л.П.Трошин, К.А.Серпуховитина Принципиальная схема, состав и последовательность технологического ...»
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА
СЕРТИФИЦИРОВАННОГО ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА ВИНОГРАДА
В.С.Петров, Л.М.Малтабар, А.И.Талаш, Л.П.Трошин, К.А.Серпуховитина
Принципиальная схема, состав и последовательность технологического процесса производства посадочного
материала винограда представлена ниже на рисунке .
1. Выделение и регистрация оздоровленных клонов .
На первом наиболее важном и ответственном этапе этого технологического процесса оригинаторы выделяют клоны, проводят их оздоровление, оформляют охранные документы на селекционное достижение, регистрируют его и создают маточник оздоровленных (оригинальных) клонов .
С этой целью в промышленных насаждениях, а также на участках отбора новых сортов, клонов и селекционных форм винограда, выявляют и отмечают кусты с высоким и качественным урожаем, сильным ростом, хорошо сформированными и окрашенными ягодами, без симптомов вирусных, фитоплазменных и трахеомикозных болезней и бактериального рака .
В маточных насаждениях подвоя визуально отбираются здоровые кусты, отличающиеся высокой продуктивностью, мощным развитием, оптимальным вызреванием и выровненным диаметром побегов .
После двух лет изучения с кустов, выделившихся самыми высокими биологическими, хозяйственными и экономическими показателями, заготавливается лоза, ее тестируют на вирусы. Здоровая лоза передается для закладки поля консервации протоклонов .
Повторное основное тестирование на наличие вирусов проводят тепличными, полевыми и лабораторными методами .
Кусты-протоклоны, у которых не была выявлена ни одна из трудноискореняемых инфекций на всех этапах тестирования, получают статус материала оздоровленного от вирусных болезней и используют для создания оздоровленных маточных насаждений протоклонов .
Завершающим этапом создания оздоровленных маточных насаждений протоклонов является их регистрация уже в качестве сортов, являющихся клонами, в ФГУ "Госкомиссия по сортоиспытанию и охране селекционных достижений РФ" .
2. Маточники привоя и подвоя - назначение, условия и требования .
2.1. Закладка маточников привоя и подвоя производится корнесобственным посадочным материалом и возделывается по интенсивной или суперинтенсивной технологии с учетом требований для посадочного материала разных категорий качества .
2.2. Оригинальный маточник закладывают вегетирующими саженцами, полученными селекционерами .
Назначение: производство материала для размножения и посадочного материала биологической категории "Оригинальный" для закладки маточников привоя и подвоя "Элитный" .
Условия возделывания:
- посадка в почву, свободную от нематод - переносчиков вирусов;
- используются участки, на которых виноград не возделывался в течение последних 12 лет;
- пространственная изоляция от других категорий виноградных насаждений не менее 500 м;
- ежегодное визуальное обследование насаждений на предмет выявления симптомов вирусных, фитоплазменных и других болезней 3 раза за период вегетации;
- ежегодное ретестирование на вирусные болезни 30% кустов (тест ELISA и др.), Agrobakterium tumefaciens vitis 25% кустов;
- устройство водоотводной канавы и шлагбаума для защиты насаждений;
- защита насаждений от воздушных переносчиков вирусных, фитоплазменных и других заболеваний .
- срок эксплуатации не более 8 лет после посадки .
- дальнейшая эксплуатация насаждений с сохранением категории на более длительный срок возможна с разрешения органа по сертификации при условии отрицательных результатов ежегодного ретестирования кустов на наличие вирусных, фитоплазменных и других заболеваний .
2.3. Элитный маточник закладывают вызревшими или вегетирующими саженцами биологической категории "Оригинальный" .
Назначение: производство материала для размножения и посадочного материала биологической категории "Элитный" для закладки маточников привоя и подвоя "Репродукционный" .
Условия возделывания:
- посадка в почву, свободную от нематод - переносчиков вирусов;
- используются участки, на которых виноград не возделывался в течение последних 10 лет;
- пространственная изоляция от других категорий виноградных насаждений не менее 500 м;
- ежегодное визуальное обследование на проявление симптомов вирусных, фитоплазменных, грибных и других болезней не менее 3 раз за период вегетации;
- ежегодное ретестирование на вирусные болезни 20% кустов (тест ELISA и др.), Agrobakterium tumefaciens vitis 7% кустов;
- устройство водоотводной канавы и шлагбаума для защиты насаждений;
- срок эксплуатации насаждений не более 9 лет после посадки;
- дальнейшая эксплуатация этих насаждений под соответствующей категорией возможна только с разрешения государственного органа по сертификации посадочного материала при условии ежегодного ретестирования 25% кустов на вирусоносительство. Разрешение выдается сроком на 1 год при условии, что результаты тестирования будут отрицательными (тест ELISA и др.) .
2.4. Репродукционный маточник закладывают вызревшими или вегетирующими саженцами биологической категории "Элитный" .
Назначение: производство материала для размножения и посадочного материала биологической категории "Репродукционный" для закладки производственных виноградников .
Условия возделывания:
- посадка в почву, свободную от нематод - переносчиков вирусов;
- используются участки, на которых виноград не возделывался в течение последних 6 лет;
- пространственная изоляция от других категорий виноградных насаждений не менее 500 м;
- ежегодное визуальное обследование на проявление симптомов вирусных, фитоплазменных, грибных и др .
болезней не менее 3 раз за период вегетации;
- ежегодное ретестирование на вирусные болезни 10% кустов (тест ELISA и др.), Agrobakterium tumefaciens vitis 5% кустов;
- устройство водоотводной канавы и шлагбаума для защиты насаждений; - срок эксплуатации насаждений не более 12 лет после посадки;
- защита насаждений от воздушных переносчиков вирусных, фитоплазменных и других болезней .
3. Виноградная школка, условия производства саженцев .
3.1. Категория элитный (сертифицированный):
- посадка проводится в почву, свободную от нематод-переносчиков вирусов (тестирование обязательно);
- посадка осуществляется в почву, на которой виноград не возделывался последние 10 лет, или виноградная школка - 6 лет;
- визуальное обследование виноградной школки трижды в течение вегетационного периода на предмет выявления симптомов вирусных, фитоплазменных, бактериальных и грибных болезней;
- тестирование ELISA - обязательно;
- пространственная изоляция от других виноградных насаждений - не менее 500 м;
- защита виноградной школки от вредных организмов .
3.2. Категория репродукционный (стандартный):
- посадка осуществляется в почву, свободную от нематод-переносчиков вирусов (тестирование обязательно);
- посадка осуществляется в почву, на которой виноград не возделывался последние 10 лет, или виноградная школка - 6 лет;
- пространственная изоляция от других виноградных насаждений - не менее 500 м;
- визуальный контроль виноградной школки проводится трижды в течение вегетационного периода на предмет выявления симптомов вирусных, фитоплазменных и грибных болезней, бактериальной инфекции;
- тестирование ELISA - обязательно;
- защита виноградной школки от вредных организмов .
4. Тестирование вегетативного материала на вирусы .
4.1. Вирусные болезни винограда:
- Вирус короткоузлия винограда - Grapevine fanleaf virus .
- Вирус желтой мозаики винограда - Grapevine yellow mozaic virus .
- Вирус окаймления жилок винограда - Grapevine vein banding .
- Вирус скручивания листьев винограда - Grapevine leafroll virus .
- Бороздчатость древесины винограда - Grapevine stem pitting .
- Некроз жилок - Grapevine vein necrosis virus .
- Прижилковая мозаика - Grapevine vein mozaic .
- Золотистое пожелтение (микоплазменная болезнь) - Flavescens doree MLO .
4.2. Методы диагностики .
4.2.1. Тепличное тестирование .
В случае, если климатические условия в теплице регулируются автоматически, возможно проведение провокационного теста на прижилковую мозаику и тестирования на травянистых индикаторах .
Тепличный провокационный тест на прижилковую мозаику В январе виноградные лозы, подлежащие тестированию, нарезаются на черенки длиной 15-20 см и высаживаются в теплицу .
По мере укоренения черенков и появления листьев проявляются симптомы прижилковой мозаики. Учеты на проявления болезни проводят в конце марта - начале апреля .
Тестирование на травянистых индикаторах Тестирование на травянистых индикаторах применяют для выявления наличия в растении механически переносимых вирусов короткоузлия, желтой мозаики, окаймления жилок. В качестве индикатора применяются растения. Инокулюм готовят из верхушек молодых побегов, листочков и корешков. Учеты появления симптомов проводят через 7-14 дней .
4.2.2. Полевое тестирование (тестирование на виноградных индикаторах) .
Индикаторные сорта винограда, применяемые для тестирования виноградной лозы на наличие вирусов Сорта-индикаторы Тестируемые болезни Рупестрис дю Ло Короткоузлие, желтая мозаика, окаймление жилок, мраморность, бороздчатость древесины Пино черный, Каберне фран Скручивание листьев винограда ЛН-33 (Кудерк 1613 х Витис Берландиери) Опробковение коры, энациоз, прижилковая мозаика, бороздчатость древесины ОРИ (Витис Рупестрис х Витис Берландиери) Некроз жилок Рипария Глуар де Монпелье Прижилковая мозаика Заражение индикаторов проводят методом настольных прививок. Каждый индикатор инокулирует в 5-ти кратной повторности. Прививки каждого тестируемого сортообразца этикетируют и стратифицируют по общепринятой технологии .
После стратификации и закалки прививки разбирают, парафинируют и высаживают в школку .
Учеты за реакцией индикаторов проводят дважды за вегетационный период - в июне и августе. В конце года при третьем тестировании проводят учеты на проявление или отсутствие симптомов бороздчатости древесины .
4.2.3. Лабораторное тестирование .
Наиболее эффективным методом диагностики является общепринятый иммуноферментный анализ (тест ELISA и др.), основанный на применении антител, меченных молекулами фермента .
Высокочувствительным, но более дорогим, требующим оснащения лаборатории электронным микроскопом, является иммуноэлектронная микроскопия .
Названными методами можно диагностировать все вирусы винограда, к которым приготовлены диагностические антисыворотки. Материалом для приготовления антигена могут служить верхушки побегов, листья, корни, вызревшая однолетняя лоза. Результаты тестирования получают в течение трех дней .
5. Фитосанитарный контроль маточных насаждений и школки .
Фитосанитарное состояние маточных насаждений винограда и виноградной школки саженцев определяется путем ежегодных визуальных обследований на наличие вредных организмов и тестирования на вирусоносительство. Визуальные обследования и взятие проб проводятся специалистами по сертификации посадочного материала .
Тестирование на вирусоносительство проводится специализированной независимой лабораторией .
5.1. Визуальные обследования маточников и виноградной школки .
Визуальное обследование маточников проводится трижды за вегетационный период .
Первое обследование проводится в период вегетации во время разрыхления соцветий, второе - сразу после цветения, третье - перед уборкой винограда .
Обнаруженные при визуальных обследованиях кусты с явными симптомами вирусных заболеваний и трахеомикозных заболеваний заносятся в журнал, отмечаются на участке .
Если лабораторное тестирование подтверждает наличие вирусных болезней у 10 % кустов, эти кусты выкорчевывают и сжигают, а маточник обследуется специальным методом. Если кустов больше 10% - оба типа маточников переводятся в производственный виноградник (насаждение привоя) или выкорчевывается (насаждение подвоя) .
5.1.1.Визуальное обследование маточников привойных лоз .
При первом визуальном обследовании выявляют кусты с симптомами короткоузлия, инфекционного хлороза, прижилковой мозаики, желтой крапчатости и болезни "энации", втором - трахеомикозы, третьем - диагностируют скручивание листьев, окаймление жилок, инфекционный хлороз, короткоузлие лозы, желтую крапчатость, золотистое пожелтение и бороздчатость древесины, бактериальный рак .
5.1.2. Визуальные обследования маточников подвойных лоз .
На маточниках подвойных лоз визуаль ные обследования проводятся в те же периоды, что и на маточниках привойных лоз. Во вр емя контроля уделяют внимание сил е роста кустов, деформациям листь ев и побегов, мозаичным симптомам тех ж е вирусных забол еваний, что и на маточниках привойных лоз, за исключением болезни - скручивание листь ев, которое поражает подвойные сорта в латентной форме .
5.1.3. Визуальные обследования виноградной школки .
Визуальное обследование проводят не менее 5-6 раз за вегетацию. При апробации обращают внимание на симптомы вирусных заболеваний, проявляющиеся в виде мозаик. Удаляются кусты с признаками бактериального рака .
5.2. Тестирование маточных насаждений винограда и школки саженцев на вирусоносительство .
Тестирование маточников подвойных и привойных лоз, партий черенков или саженцев винограда проводят лабораторными методами. Для этих целей чаще всего используют иммуноферментный анализ (тест ELISA и др.) .
Для тестирования специалистами государственного органа по сертификации посадочного материала отбираются пробы, которые могут состоять из листьев, черенков вызревшей однолетней лозы, почек, корней .
Проба в зависимости от тестируемого материала может состоять из:
- 20 листьев с нижнего яруса однолетних побегов (для вируса скручивания листьев винограда);
- 20 листьев диаметром 6-8 см (для остальных вирусов);
- 10 черенков длиной 15-25 см и толщиной 8-13 мм, один черенок от каждых 400 стандартных черенков или от каждых 250 стандартных саженцев;
- 10 корешков длиной 12-20 см и толщиной 2-3 мм, один корешок от каждых 200 стандартных саженцев .
Контроль за состоянием маточных насаждений осуществляется путем ежегодного тестирования (тест ELISA):
- 50% кустов на плантациях, производящих материал для размножения биологической категории оригинальный (базовый) (каждый второй куст);
- 30% кустов на плантациях, производящих материал для размножения биологической категории элитный (сертифицированный) (каждый третий куст);
- 20% кустов на плантациях, производящих материал для размножения биологической категории репродукционный (стандартный) (каждый пятый куст);
В школках, производящих привитые саженцы биологической категории элитный (сертифицированный) отбирается один лист с каждых 5 погонных м етров (1 погонный метр = 1 5 саженцам), для категории репродукционный (стандартный) - один лист с каждых 10 погонных метров .
Тест ELISA проводится для:
маточников - на листьях или на черенках;
саженцев - на листьях или на черенках, или на корешках .
- при тестировании саженцев (привитых или корнесобственных) берут 10 корешков из пучка стандартной упаковки;
- при тестировании партии лозы (привойной или подвойной) берут 10% черенков из пучка .
Отобранные для тестирования пробы помещают в полиэтиленовые пакеты, на которых указывают сведения о хозяйстве, участке, названии сорта и координаты кустов, органы, которые составляют пробу .
Пробы листьев отбирают в прохладное время суток, помещают в полиэтиленовые пакеты, которые в свою очередь кладут в термосы, сумки-холодильники, и доставляют в лабораторию в день их взятия .
5.3. Тестирование материала для размножения и виноградного посадочного материала на наличие скрытой формы бактериального рака .
Тестирование на наличие скрытой формы бактериального рака проводится микробиологическим методом (Леманова, 2001) .
Пробы отбираются осенью после опадения листьев (один черенок длиной 15-25 см и диаметром 8-13 мм от каждого куста; средняя проба - 10 кустов). С маточников пробы могут отбираться и весной .
5.4. Тестирование почвы на наличие нематод .
Контроль почвы на наличие нематод-переносчиков вирусов проводится за год до посадки маточников или школки саженцев .
Отбор почвенных образцов проводится из расчета не менее 5 образцов с гектара с глубины 8-60 см. Каждый образец составляется из трех проб, 150 грамм почвы каждая, взятая с трех вертикальных глубин: 0-20, 20-40 и 40-60 см .
Каждая проба помещается в полиэтиленовый мешочек, который этикетируется с указанием наименования хозяйства, места участка и его площади. Пробы хранятся в холодном месте и в течение 48 часов доставляются для их исследования в независимую специальную лабораторию .
6. Меры по предупреждению вторичного заражения виноградных насаждений вирусными болезнями и бактериальным раком .
В целях предупреждения заражения насаждений категорий оригинальный (базовый), элитный (сертифицированный) и репродукционный (стандартный) вирусами и фитоплазменными болезнями путем их заноса насекомыми и нематодами-переносчиками или сельскохозяйственными орудиями, ливневыми и талыми водами необходимо в обязательном порядке проводить следующие мероприятия:
- необходимо маточники и школки, закладываемые безвирусным посадочным материалом, размещать на водоразделе или в средней части склона. Выше по склону могут размещаться только зерновые или виноградные маточники той же категории;
- сертифицированные маточники должны быть окружены водоотводной канавой размером 1,0 х 0,8 м;
- агрегаты для обработки почвы, опрыскиватели перед работой на сертифицированных маточниках, школках должны быть тщательно отмыты от почвы и растительных остатков и просушены на солнце в течение 4-5 часов .
Лучше, чтобы они не выходили за пределы этих насаждений;
- из севооборота виноградной школки, производящей посадочный материал биологических категорий элитный (сертифицированный) и репродукционный (стандартный) должны быть исключены следующие культуры:
овощные (в особенности помидоры, перец, картофель), подсолнечник, малина, земляника, смородина, сеянцы плодовых культур (в частности, косточковых культур), которые имеют некоторые общие с виноградом вирусные болезни и могут быть резерваторами инфекции. Разрешается включать в севооборот виноградной школки вышеуказанных биологических категорий только следующие культуры: зерновые, зернобобовые, лук, арбузы и дыни;
- во время вегетации должны своевременно проводиться все химические защитные обработки насаждений, в том числе против переносчиков вирусных и фитоплазменных заболеваний - цикадок, червецов, щитовок .
Химическая обработка маточников и школок саженцев против переносчиков, а также листовой формы филлоксеры, проводится в соответствии с прогнозом научно-исследовательских учреждений, станций защиты растений;
- посадка саженцев на постоянное место посадочным материалом категории репродукционный осуществляется на участках, на которых виноград не возделывался последние 6 лет;
- кусты, пораженные бактериальным раком (с явными симптомами), выкорчевывают и сжигают; саженцы из школки уничтожают .
ЛИТЕРАТУРА
1. Виноградарство / К.В.Смирнов, Л.М.Малтабар, А.К.Раджабов, Н.В.Матузок. - М.: МСХА, 1998. - 511 с .
2. Леманова Н.Б. Метод диагностики латентной инфекции бактериального рака для фитосанитарного отбора свободных от заболеваний растений винограда. - Кишинев, 2001. - 20 с .
3. Малтабар Л.М. Система и суперинтенсивная технология производства сертифицированного виноградного посадочного материала // Совершенствование сортимента, производство посадочного материала и винограда. - Краснодар, 2002. - С. 98-104 .
4. Система и технология производства сертифицированных черенков винограда / Л.М.Малтабар, Д.М.Козаченко, И.Н.Василевский, Н.И.Мельник. - Краснодар, 2001. - 126 с .
5. Трошин Л.П., Смурыгин А.С. Проблемы производства оздоровленного посадочного материала винограда // Материалы научнопрактической конференции "Формы и методы научного и организационно-экономического обеспечения отраслей в условиях рыночных отношений". - Краснодар, 2001. - С. 163-166 .
[ 
«